结直肠癌分子检测的基本要求 

1. 对不可切除晚期或复发性CRC患者进行抗EGFR单克隆抗体治疗之前，推荐进行RAS（KRAS/NRAS）突变检测（强烈推荐）。

几个随机临床研究表明，抗EGFR单克隆抗体治疗不能使KRAS外显子2、3、4和NRAS外显子2、3、4突变患者获益。这也在大规模META分析中得到证实，不论抗EGFR单克隆抗体类型（西妥昔单抗或帕尼单抗）、联合化疗和化疗类型如何，都发现这种趋势的可重复性。

2. 推荐经认证的有效方法如体外诊断对肿瘤组织样本进行RAS突变检测（强烈推荐）。

检测RAS突变的方法包括：(i)PCR为基础的特异性检测技术，如等位基因特异性PCR和PCR-rSSO；(ii)扩增靶基因再直接测序

3. 晚期或复发性CRC患者一线治疗之前，推荐进行BRAF V600E突变检测（推荐）。

BRAF V600E突变是CRC患者预后不良的独立预测指标。最近有研究报道，三联化疗（FOLFOXIRI）氟尿嘧啶（5-FU）+奥沙利铂+伊立替康联合贝伐珠单抗对不可切除晚期或复发性BRAF V600E突变的CRC患者更有效。欧洲医学肿瘤学协会（ESMO）共识指南也推荐三联化疗+贝伐珠单抗是BRAF V600E突变患者的最佳选择。

4. 对肿瘤组织样本直接进行测序（结合手工显微解剖）或使用PCR为基础的方法检测BRAF V600E突变（推荐）。

在以往的研究中，直接测序的突变检出限为10%-25%。其他方法的突变检出限为1% - 10%。考虑到这些不同的检测方法对该预后不良指标显示一致性结果，建议检测BRAF V600E突变的检出限为1%～10%。

实施各基因检测的时间和种类

参考文献：

Kentaro Yamazaki,et al.Japanese Society of Medical Oncology Clinical Guidelines:Molecular Testing for Colorectal Cancer Treatment, Third Edition.2018 Jun;109(6):2074-2079.